Влияние метионина в защищенной от разрушения в рубце форме на продуктивность и выделение азота у лактирующих молочных коров

Г. А. Бродерик,*² М. Дж. Стивенсон,†³ Р. А. Паттон,‡ Н. Э. Лобос§ и Дж. Дж. Олмос Кольменеро§⁴

Аффилиация авторов: Служба сельскохозяйственных исследований, Министерство сельского хозяйства США, Центр исследований фуражных кормов для молочного скота США, 1925 Линден Драйв Уэст, Мэдисон, Висконсин 53706, США
† Аффилиация авторов: Degussa Canada Inc., Берлингтон, Онтарио L7R 3Y8, Канада
‡ Аффилиация авторов: Nittany Dairy Nutrition Inc., Миффлинбург, Пенсильвания 17844, США
§ Аффилиация авторов: Факультет молочного животноводства, Висконсинский университет, Мэдисон, Висконсин 53706, США

Аннотация

Проведены два эксперимента по схеме латинского квадрата 4×4 для определения возможности снижения доли сырого протеина (СП) в рационе с помощью защищенного от разрушения в рубце метионина (в форме препарата «Мепрон»®) без ущерба для продуктивности, с целью уменьшения экскреции азота с мочой.

В Опыте 1 24 лактирующие коровы голштинской породы получали 4 рациона (% от сухого вещества, СВ): 1) 18.6% СП + 0 г/д защищенного метионина; 2) 17.3% СП + 5 г/д; 3) 16.1% СП + 10 г/д; 4) 14.8% СП + 15 г/д. Снижение СП достигалось заменой соевого шрота на обмолоченную кукурузу с высоким содержанием влаги. Рационы не влияли на потребление СВ, привес, содержание белка и лактозы в молоке. Однако рационы с 17.3% и 16.1% СП в сочетании с метионином обеспечили более высокие удои. Эффективность использования азота корма на синтез молочного белка (азот молока / потребленный азот) была наивысшей при самом низком уровне СП и самом высоком уровне метионина. Снижение СП в рационе вызывало линейное уменьшение концентрации мочевины в молоке (АММ) и экскреции азота с мочой.

В Опыте 2 32 коровы получали рационы с 16.1% и 17.3% СП в сочетании с 0 или 10 г/д защищенного метионина. Из-за неожиданно низкого потребления СВ у коров в среднем наблюдался отрицательный азотистый баланс. Добавка метионина не повлияла на продуктивность, но более высокий уровень СП (17.3%) вызвал небольшое увеличение надоев, выхода белка и сухого обезжиренного молочного остатка (СОМО). При 16.1% СП эффективность использования азота возросла, а АММ снизилась.

Выводы: В Опыте 1 добавление защищенного метионина к низкопротеиновым рационам улучшило использование азота и снизило его экскрецию с мочой. Сохранить надои и снизить выделение азота лучше всего удалось при рационе с 16.1% СП и 10 г защищенного метионина (17 г «Мепрон»а) в день. В Опыте 2 снижение СП с 17.3% до 16.1% уменьшило надои, и защищенный метионин не смог компенсировать это снижение на фоне недостаточного потребления СВ и мобилизации белков тела.

Ключевые слова: защищенный метионин, сырой протеин рациона, молочная продуктивность, использование азота, экскреция азота.

Получено: 10.10.2007
Принято: 05.12.2007

¹ Упоминание торговых названий или коммерческих продуктов в этой статье служит только для научного описания и не подразумевает рекомендации со стороны USDA-ARS.
² Автор-корреспондент: glen.broderick@ars.usda.gov
³ Текущий адрес: Halchemix Canada Inc., 304 Toronto Street South, Suite 216, Uxbridge, ON L9P 1H3, Canada.
⁴ Текущий адрес: Centro Universitario de los Altos, Universidad de Guadalajara, Carretera a Yahualica Km. 7.5, Tepatitlan de Morelos, Jalisco, Mexico CP 47600.

1. Введение

Метионин признан первой лимитирующей аминокислотой в рационах молочных коров на основе кукурузного силоса, фуражных бобовых и сои (Schwab et al., 1976; NRC, 2001). Добавление защищенного метионина может повышать удои и выход молочного белка (Armentano et al., 1997; Schmidt et al., 1999). Это позволяет снизить уровень сырого протеина (СП) в рационе без потери продуктивности. Снижение СП уменьшает экскрецию азота с мочой, что важно с экологической точки зрения (Broderick, 2003). Исследования показывают, что реакция на добавление лимитирующей аминокислоты может быть нелинейной (Lapierre et al., 2005). Целью данной работы было изучить влияние градиента снижения СП с компенсацией защищенным метионином («Мепрон», Degussa Corp.) на продуктивность коров и обмен азота в двух экспериментах.

2. Материалы и методы

2.1. Дизайн экспериментов и животные

Опыт 1. Использовали 24 лактирующие коровы (16 многократно и 8 первотелок) со средними показателями: удой 45±6 кг/д, день лактации 100±42, живая масса 598±73 кг. Дизайн – 6 повторяющихся латинских квадратов 4×4. Периоды по 28 дней (14 – адаптация, 14 – сбор данных). Дополнительно 4 коровы с фистулой рубца использовались для отбора проб содержимого рубца.
Опыт 2. Использовали 32 лактирующие коровы (20 многократно, в т.ч. 4 с фистулой рубца, и 12 первотелок) со средними показателями: удой 44±6 кг/д, день лактации 116±29, живая масса 604±73 кг. Дизайн – 8 повторяющихся латинских квадратов 4×4. Факторная схема 2×2: два уровня СП (17.3% и 16.1%) и два уровня защищенного метионина (0 и 10 г/д).

В обоих опытах коровам вводили бычий соматотропин (500 мг Posilac® каждые 14 дней). Животные содержались в стойлах на привязи с постоянным доступом к воде.

2.2. Рационы и химический состав кормов

Основу рационов составляли люцерновый силос, кукурузный силос, обмолоченная кукуруза с высоким содержанием влаги (HMSC), экстрагированный растворителями соевый шрот (SSBM), обжаренная соя (RSB) и соевая шелуха.

Химический состав основных кормовых ингредиентов:

Сухое вещество (СВ), %: Люцерновый силос – 39.2; Кукурузный силос – 38.7; HMSC – 75.7; SSBM – 90.6; RSB – 97.1; Соевая шелуха – 91.9.
Сырой протеин (СП), % от СВ: Люцерновый силос – 25.4; Кукурузный силос – 6.8; HMSC – 8.2; SSBM – 55.3; RSB – 42.9; Соевая шелуха – 12.2.
НДК, % от СВ: Люцерновый силос – 33.7; Кукурузный силос – 40.8; HMSC – 8.7; SSBM – 7.8; RSB – 23.9; Соевая шелуха – 64.0.
КДК, % от СВ: Люцерновый силос – 24.6; Кукурузный силос – 22.3; HMSC – 2.1; SSBM – 4.2; RSB – 4.4; Соевая шелуха – 44.8.
Незаменимые аминокислоты, г/100 г СП (пример): Лизин в SSBM – 5.92, в HMSC – 2.68; Метионин в SSBM – 1.37, в HMSC – 2.03.

Состав и характеристика рационов (Опыт 1 и Опыт 2):

Ингредиенты (% от сухого вещества, СВ):

Люцерновый силос: 20.9% (для всех рационов в обоих опытах).
Кукурузный силос: 28.1% (для всех рационов в обоих опытах).
Обмолоченная кукуруза с высокой влажностью (HMSC):

Опыт 1: 18.6% СП / 0 г метионина: 28.0%; 17.3% СП / 5 г: 30.7%; 16.1% СП / 10 г: 33.3%; 14.8% СП / 15 г: 36.0%.
Опыт 2: 17.3% СП / 0 г: 30.7%; 17.3% СП / 10 г: 30.7%; 16.1% СП / 0 г: 33.3%; 16.1% СП / 10 г: 33.3%.

Экстрагированный соевый шрот (SSBM):

Опыт 1: 18.6% СП / 0 г: 11.7%; 17.3% СП / 5 г: 8.9%; 16.1% СП / 10 г: 6.2%; 14.8% СП / 15 г: 3.5%.
Опыт 2: 17.3% СП / 0 г: 8.9%; 17.3% СП / 10 г: 8.9%; 16.1% СП / 0 г: 6.2%; 16.1% СП / 10 г: 6.2%.

Обжаренная соя (RSB): 4.5% (для всех рационов).
Соевая шелуха: 5.8% (для всех рационов).
Мепрон® (источник защищенного метионина):

Опыт 1: 18.6% СП / 0 г: 0%; 17.3% СП / 5 г: 0.035%; 16.1% СП / 10 г: 0.07%; 14.8% СП / 15 г: 0.105%.
Опыт 2: 17.3% СП / 0 г: 0%; 17.3% СП / 10 г: 0.07%; 16.1% СП / 0 г: 0%; 16.1% СП / 10 г: 0.07%.

Минеральные и витаминные добавки (бикарбонат натрия, дикальцийфосфат, соль, премикс): ~1.1% (постоянно для всех рационов).

Химический состав рационов:

СВ, %: Опыт 1: 51.4, 51.0, 51.5, 51.3 (для четырех рационов соответственно); Опыт 2: 49.3, 49.3, 49.1, 49.5.
СП, % от СВ: Опыт 1: 18.6, 17.3, 16.1, 14.8; Опыт 2: 17.3, 17.3, 16.1, 16.1.
НДК, % от СВ: ~26.6-26.7 (для всех рационов).
Крахмал, % от СВ: Опыт 1: 23.0, 24.5, 26.1, 27.9; Опыт 2: 24.8, 24.6, 26.3, 26.5.
Расчетные показатели (NRC, 2001):

Разрушаемый в рубце белок, % от СВ: Опыт 1: 12.3, 11.5, 10.8, 10.0; Опыт 2: 11.7, 11.6, 11.0, 11.0.
Переваримый метионин, г/день: Опыт 1: 47, 51, 56, 59; Опыт 2: 43, 53, 42, 50.
Соотношение Лизин:Метионин: Опыт 1: 3.7, 3.2, 2.9, 2.6; Опыт 2: 3.6, 2.9, 3.5, 2.9.

2.3. Отбор проб и анализы
Ежедневно отбирали пробы кормов и остатков для определения потребления СВ. Образцы кормов анализировали на содержание СВ, золы, сырого протеина (метод Кьельдаля), НДК, КДК, нейтрально- и кислотно-детергентного нерастворимого азота (НДНА, КДНА), крахмала, жира и аминокислотного состава (кислотный гидролиз с последующей ионообменной хроматографией).

Молоко учитывали дважды в день, пробы отбирали на 17-й и 24-й дни каждого периода и анализировали на содержание жира, белка, лактозы, СОМО (ИК-спектрометрия) и мочевины (колориметрически). Рассчитывали суточные выходы компонентов.

На 26–27 дни периодов у 16 коров в каждом опыте отбирали пробы кала (для оценки переваримости с использованием непереваримой КДК в качестве внутреннего маркера) и мочи (для оценки объема по креатинину и анализа общего азота, азота мочевины). Рассчитывали азотистый баланс.

У коров с фистулой рубца отбирали пробы содержимого рубца в различные моменты времени после кормления для определения pH, концентрации аммиака, летучих жирных кислот (ЛЖК) и свободных аминокислот.

2.4. Статистический анализ
Данные анализировали с использованием процедуры SAS для повторяющихся латинских квадратов. В Опыте 1 влияние уровня СП (игнорируя метионин) на параметры азотного обмена тестировали с помощью линейных и квадратичных контрастов. В Опыте 2 использовали ортогональные контрасты для оценки влияния уровня СП, добавки метионина и их взаимодействия. Данные по рубцу анализировали с учетом повторных измерений во времени. Различия считали значимыми при P≤0.05 и тенденцией при P≤0.10.

3. Результаты и обсуждение

3.1. Опыт 1: Влияние ступенчатого снижения СП с компенсацией метионином

Продуктивность и параметры молока:

Потребление СВ, кг/день: 23.4, 23.4, 23.8, 23.7 (для рационов 18.6%;0г, 17.3%;5г, 16.1%;10г, 14.8%;15г соответственно). Различий нет (P=0.85).
Удой молока, кг/день: 39.7, 41.6, 41.6, 39.7. Рационы с 17.3% и 16.1% СП обеспечили более высокие удои (P=0.05).
Молочный белок, кг/день: 1.15, 1.23, 1.23, 1.20. Тенденция к увеличению выхода белка на рационах с метионином (P=0.16).
Азот мочевины в молоке (АММ), мг/дл: 14.5, 11.8, 9.5, 7.9. Линейное снижение при уменьшении СП (P<0.01).

Использование азота и его экскреция:

Эффективность использования азота (N молока / N потребленный), %: 26.2, 29.9, 31.7, 34.0. Линейное увеличение при снижении СП (P<0.01). Наивысшее значение при 14.8% СП + 15 г метионина.
Общий азот в моче, г/день: 260, 207, 188, 150. Линейное снижение (P<0.01).
Азотистый баланс, г/день: 28, 25, 14, -7. Отрицательный баланс наблюдался только при рационе с 14.8% СП.

Параметры рубца:

pH: 6.47, 6.47, 6.49, 6.64. Повышение при самом низком СП (P=0.07).
Аммиачный азот, мг/дл: 9.75, 7.88, 6.10, 5.86. Линейное снижение (P<0.01).
Общее содержание ЛЖК, ммоль: 98.8, 92.4, 89.0, 87.9. Снижение при уменьшении СП (P=0.08).

Обсуждение: Результаты Опыта 1 показали, что защищенный метионин позволяет снизить уровень СП в рационе с 18.6% до 16.1% без потери продуктивности, одновременно улучшая использование азота и уменьшая его экскрецию с мочой. Оптимальный баланс между продуктивностью и экологичностью был достигнут при рационе с 16.1% СП и 10 г/д защищенного метионина. Дальнейшее снижение СП до 14.8% привело к потере молока и отрицательному азотистому балансу, несмотря на максимальную дозу метионина, что указывает на возможный дефицит других лимитирующих аминокислот (например, лизина).

3.2. Опыт 2: Влияние двух уровней СП и защищенного метионина

Продуктивность и параметры молока:

Потребление СВ, кг/день: 21.7 (17.3%;0г), 21.8 (17.3%;10г), 21.6 (16.1%;0г), 20.9 (16.1%;10г). Тенденция к снижению при 16.1% СП (P=0.08).
Удой молока, кг/день: 39.8, 40.1, 39.2, 38.7. Небольшое, но значимое снижение при 16.1% СП (P=0.04). Метионин не повлиял (P=0.80).
Молочный белок, кг/день: 1.21, 1.23, 1.19, 1.17. Снижение при 16.1% СП (P=0.04).
АММ, мг/дл: 12.4, 12.1, 10.2, 10.2. Снижение при 16.1% СП (P<0.01).

Использование азота и его экскреция:

Эффективность использования азота, %: 31.9, 32.4, 34.3, 34.7. Увеличение при 16.1% СП (P<0.01).
Общий азот в моче, г/день: 188, 204, 176, 180. Снижение при 16.1% СП (P<0.01).
Азотистый баланс, г/день: -18, -22, -13, -23. Отрицательный по всем рационам, различий нет.

Параметры рубца (ключевые показатели):

pH, аммиак, ЛЖК: Не различались между рационами (P>0.22).
Общее содержание свободных аминокислот, ммоль: 7.75 (17.3%;0г), 5.30 (17.3%;10г), 8.06 (16.1%;0г), 5.10 (16.1%;10г). Снижение при добавлении метионина (P=0.05).

Обсуждение: В Опыте 2 потребление СВ было в среднем на 2.1 кг/день ниже, чем в Опыте 1, что привело к отрицательному азотистому балансу. В этих условиях снижение СП с 17.3% до 16.1% уменьшило продуктивность, а добавка защищенного метионина не смогла ее восстановить. Это указывает на то, что при выраженном отрицательном энергетическом и азотистом балансе, когда происходит мобилизация тканевых белков, эффективность добавки первой лимитирующей аминокислоты может быть ограничена. Положительным эффектом снижения СП, как и в Опыте 1, стало улучшение использования азота и снижение АММ.

4. Выводы

Защищенный метионин («Мепрон») может эффективно компенсировать снижение сырого протеина в рационе с 18.6% до 16.1% от СВ, позволяя поддерживать продуктивность дойных коров при одновременном улучшении использования азота и снижении его экскреции с мочой.
Оптимальный с точки зрения продуктивности и экологичности рацион в условиях Опыта 1 содержал 16.1% СП и 10 г/д защищенного метионина (эквивалентно ~17 г/д продукта «Мепрон»).
Эффективность защищенного метионина зависит от общего уровня потребления корма и метаболического статуса коров. При недостаточном потреблении сухого вещества и развитии отрицательного азотистого баланса (Опыт 2) добавка метионина не смогла предотвратить снижение надоев при уменьшении СП с 17.3% до 16.1%.
Снижение уровня СП в рационе независимо от опыта является надежным способом уменьшения концентрации мочевины в молоке и экскреции азота с мочой, что важно для снижения экологической нагрузки.

Благодарность

Авторы благодарят Рика Вальгенбаха и работников его фермы за сбор и хранение кормовых ингредиентов; Джил Дэвидсон и работников ее коровника за обеспечение кормления и содержания животных на опытной ферме при Центре исследований фуражных кормов для молочного скота США (Прейри-дю-Сак, Висконсин); Венди Рэдлоф, Мэри Бекер и Стивена Дидериха за содействие в отборе и лабораторном анализе образцов; и Питера Крампа за помощь со статистическим анализом. Также выражается благодарность компании Degussa Co. за частичное финансирование данного исследования.

Список научных источников

AOAC. 1980. Official Methods of Analysis. 13th ed. Assoc. Off. Anal. Chem., Washington, DC.
AOAC. 1990. Official Methods of Analysis. 15th ed. Assoc. Off. Anal. Chem., Arlington, VA.
AOAC. 1997. Official Methods of Analysis. 16th ed. Assoc. Off. Anal. Chem., Arlington, VA.
Armentano, L. E., S. J. Bertics, and G. A. Ducharme. 1997. Response of lactating cows to methionine or methionine plus lysine added to high protein diets based on alfalfa and heated soybeans. J. Dairy Sci. 80:1194–1199.
Berthiaume, R., P. Dubreuil, M. Stevenson, B. W. McBride, and H. Lapierre. 2001. Intestinal disappearance and mesenteric and portal appearance of amino acids in dairy cows fed ruminally protected methionine. J. Dairy Sci. 84:194–203.
Berthiaume, R., M. C. Thivierge, R. A. Patton, P. Dubreuil, M. Stevenson, B. W. McBride, and H. Lapierre. 2006. Effect of ruminally protected methionine on splanchnic metabolism of amino acids in lactating dairy cows. J. Dairy Sci. 89:1621–1634.
Blum, J. W., R. M. Bruckmaier, and F. Jans. 1999. Rumen-protected methionine fed to dairy cows: Bioavailability and effects on plasma amino acid pattern and plasma metabolite and insulin concentrations. J. Dairy Sci. 82:1991–1998.
Broderick, G. A. 1987. Determination of protein degradation rates using a rumen in-vitro system containing inhibitors of microbial nitrogen metabolism. Br. J. Nutr. 58:463–476.
Broderick, G. A. 2003. Effects of varying dietary protein and energy levels on the production of lactating dairy cows. J. Dairy Sci. 86:1370–1381.
Broderick, G. A., and M. K. Clayton. 1997. A statistical evaluation of animal and nutritional factors influencing concentrations of milk urea nitrogen. J. Dairy Sci. 80:2964–2971.
Broderick, G. A., P. Ude´n, M. L. Murphy, and A. Lapins. 2004. Sources of variation in rates of in vitro ruminal protein degradation. J. Dairy Sci. 87:1345–1359.
Brotz, P. G., and D. M. Schaefer. 1987. Simultaneous determination of lactic acid and volatile fatty acids in microbial fermentation extracts by gas-liquid chromatography. J. Microbiol. Methods 6:139–144.
Cochran, R. C., D. C. Adams, J. D. Wallace, and M. L. Galyean. 1986. Predicting digestibility of different diets with internal markers: Evaluation of four potential markers. J. Anim. Sci. 63:1476–1487.
Hall, M. B. 2003. Challenges with nonfiber carbohydrate methods. J. Anim. Sci. 81:3226–3232.
Hall, M. B., W. H. Hoover, J. P. Jennings, and T. K. M. Webster. 1999. A method for partitioning neutral detergent-soluble carbohydrates. J. Sci. Food Agric. 79:2079–2086.
Hintz, R. W., D. R. Mertens, and K. A. Albrecht. 1995. Effects of sodium sulfite on recovery and composition of detergent fiber and lignin. J. AOAC. 78:16–22.
Huhtanen, P., K. Kaustell, and S. Jaakkola. 1994. The use of internal markers to predict total digestibility and duodenal flow of nutrients in cattle given six different diets. Anim. Feed Sci. Technol. 48:211–227.
Lanzas, C., C. J. Sniffen, S. Seo, L. O. Tedeschi, and D. G. Fox. 2007. A revised CNCPS feed carbohydrate fractionation scheme for formulating rations for ruminants. Anim. Feed Sci. Technol. 136:167–190.
Lapierre, H., R. Berthiaume, G. Raggio, M. C. Thivierge, L. Doepel, D. Pacheco, P. Dubreuil, and G. E. Lobley. 2005. The route of absorbed nitrogen into milk protein. Anim. Sci. 80:10–22.
Leonardi, C., M. Stevenson, and L. E. Armentano. 2003. Effect of two levels of crude protein and methionine supplementation on performance of dairy cows. J. Dairy Sci. 86:4033–4042.
Licitra, G., T. M. Hernandez, and P. J. Van Soest. 1996. Standardization of procedures for nitrogen fractionation of ruminant feeds. Anim. Feed. Sci. Technol. 57:347–358.
Muck, R. E. 1982. Urease activity in bovine feces. J. Dairy Sci. 65:2157–2163.
Muck, R. E. 1987. Dry matter level effects on alfalfa silage quality. 1. Nitrogen transformations. Trans. ASAE 30:7–14.
Nousiainen, J., K. J. Shingfield, and P. Huhtanen. 2004. Evaluation of milk urea nitrogen as a diagnostic of protein feeding. J. Dairy Sci. 87:386–398.
NRC. 2001. Nutrient Requirements of Dairy Cattle. 7th rev. ed. Natl. Acad. Sci., Washington, DC.
Oba, M., and M. S. Allen. 2003. Effects of diet fermentability on efficiency of microbial nitrogen production in lactating dairy cows. J. Dairy Sci. 86:195–207.
Olmos Colmenero, J. J., and G. A. Broderick. 2006a. Effect of amount and ruminal degradability of soybean meal protein on performance of lactating dairy cows. J. Dairy Sci. 89:1635–1643.
Olmos Colmenero, J. J., and G. A. Broderick. 2006b. Effect of dietary crude protein concentration on milk production and nitrogen utilization in lactating dairy cows. J. Dairy Sci. 89:1704–1712. Журнал Journal of Dairy Science, том 91, № 3, 2008 г.
Oser, B. L. 1965. Hawk’s Physiological Chemistry. 14 ed. McGraw-Hill, New York, NY.
Overton, T. R., L. S. Emmert, and J. H. Clark. 1998. Effects of source of carbohydrate and protein and rumen-protected methionine on performance of cows. J. Dairy Sci. 81:221–228.
Pisulewski, P. M., H. Rulquin, J. L. Peyraud, and R. Verite. 1997. Lactational and systemic responses of dairy cows to postruminal infusions of increasing amounts of methionine. J. Dairy Sci. 79:1781–1791.
Rulquin, H., and L. Delaby. 1997. Effects of the energy balance of dairy cows on lactational responses to rumen-protected methionine. J. Dairy Sci. 80:2513–2522.
SAS Institute. 1999–2000. SAS/STAT User’s Guide: Release 8.1. SAS Inst. Inc., Cary, NC.
Satter, L. D., and L. L. Slyter. 1974. Effect of ammonia concentration on rumen microbial protein production in-vitro. Br. J. Nutr. 32:199–208.
Schei, I., A. Danfær, I. A. Boman, and H. Volden. 2007. Post-ruminal or intravenous infusions of carbohydrates or amino acids to dairy cows. 1. Early lactation. Animal 1:501–514.
Schmidt, J., P. Sipocz, E. Cenkvari, and J. Sipocz. 1999. Use of protected methionine (Mepron M 85) in cattle. Acta Vet. Hung. 47:409–418.
Schneider, B. H., and W. P. Flatt. 1975. The Evaluation of Feeds Through Digestibility Experiments. Univ. Georgia Press, Athens.
Schwab, C. G., C. K. Bozak, N. L. Whitehouse, and M. M. A. Messbah. 1992. Amino acid limitation and flow to duodenum at four stages of lactation. 1. Sequences of lysine and methionine limitation. J. Dairy Sci. 75:3486–3502.
Schwab, C. G., L. D. Satter, and A. B. Clay. 1976. Responses of lactating dairy cows to abomasal infusions of amino acids. J. Dairy Sci. 59:1254–1270.
Socha, M. T., D. E. Putnam, B. D. Garthwaite, N. L. Whitehouse, N. A. Kierstead, C. G. Schwab, G. A. Ducharme, and J. C. Robert. 2005. Improving intestinal amino acid supply of pre- and postpartum dairy cows with rumen-protected methionine and lysine. J. Dairy Sci. 88:1113–1126.
Stokes, S. R., W. H. Hoover, T. K. Miller, and R. Blauweikel. 1991. Ruminal digestion and microbial utilization of diets varying in type of carbohydrate and protein. J. Dairy Sci. 74:871–881.
Valadares, R. F. D., G. A. Broderick, S. C. Valadares Filho, and M. K. Clayton. 1999. Effect of replacing alfalfa silage with high moisture corn on ruminal protein synthesis estimated from excretion of total purine derivatives. J. Dairy Sci. 82:2686–2696.
Van Soest, P. J., J. B. Robertson, and B. A. Lewis. 1991. Methods for dietary fiber, neutral detergent fiber and nonstarch polysaccharides in relation to animal nutrition. J. Dairy Sci. 74:3583–3597.